分離以尿素為氮源的微生物的分離
一、理論基礎(chǔ)
1．篩選菌株
（1）實(shí)驗(yàn)室中微生物篩選的原理：人為提供有利于 生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等)，同時(shí) 或 其他微生物生長(zhǎng)。 （2）選擇培養(yǎng)基：在微生物學(xué)中，將允許 種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí) 和 其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。
（3）配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)：根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點(diǎn)加入某種物質(zhì)以達(dá)到選擇的目的。例如，培養(yǎng)基中不加入有機(jī)物可以選擇培養(yǎng) 微生物；培養(yǎng)基中不加入氮元素，可以選擇培養(yǎng) 的微生物；加入高濃度的食鹽可選擇耐鹽的菌等。
2．統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目
（1）測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法有 和 。（2）稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目的原理：當(dāng)樣品的 足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè) 。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在 范圍內(nèi)的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。此外，測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法還有 直接計(jì)數(shù)。3．設(shè)置對(duì)照
設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中 對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的 。例如為了排除培養(yǎng)基是否被雜菌污染了，需以培養(yǎng) 的培養(yǎng)基作為空白對(duì)照。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
1．取樣：從肥沃、濕潤(rùn)的土壤中取樣（浙科版：從哺乳動(dòng)物排泄物的地方取樣）。應(yīng)先 3cm左右，再取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的容器中。2．制備 ：準(zhǔn)備牛肉膏蛋白胨（全營(yíng)養(yǎng)）培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基，將菌液稀釋相同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯 選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因此，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基可以作為 ，用來(lái)判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用。3．微生物的 與觀察：將10g/1g土樣加入盛有90 mL/99ml無(wú)菌水的錐形瓶中(體積為250 mL)，充分搖勻，吸取上清液 ，轉(zhuǎn)移至盛有 的生理鹽水的無(wú)菌大試管中，將土樣以1、10、 103…… 依次等比稀釋至107稀釋度，并按照由107～103稀釋度的順序分別吸取 進(jìn)行平板涂布操作。每個(gè)稀釋度下需要3個(gè)選擇培養(yǎng)基、1個(gè)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。將涂布好的培養(yǎng)皿放在30℃溫度下培養(yǎng)，及時(shí)觀察和記錄。
4．細(xì)菌的計(jì)數(shù)：當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，選取菌落數(shù) 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。在同一稀釋度下，至少對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出 ，并根據(jù)平板所對(duì)應(yīng)的稀釋度計(jì)算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目。
答案：
一、1 （1）目的菌珠 抑制 阻止 （2）特定 抑制 阻止 （3）自養(yǎng) 能固氮的微生物；2 (1)有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)。 (2).稀釋度 細(xì)菌 30-300 （顯微鏡）血細(xì)胞計(jì)數(shù)板3.非測(cè)試因素 可信度 無(wú)雜菌污染 研究土壤中微生物的二、1. 土壤，鏟去表層土 2. 培養(yǎng)基 多于 對(duì)照 3.培養(yǎng) 1ml 9ml 0.1mL 4. 30-300 平均數(shù)三、問(wèn)卷星測(cè)試（一圖多題，一個(gè)圖多個(gè)選項(xiàng)）
高階水平
四、視頻解析：
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