BIOX.CN 2006-8-24 23:33:56 來源：生命經(jīng)緯
液相色譜系統(tǒng)的許多問題都能在譜圖上反映出來。其中有一些問題可以通過改變設(shè)備參數(shù)得到解決；而其他的問題必須通過修改操作程序來解決。對于色譜柱和流動相的正確選擇是得到好的色譜圖的關(guān)鍵。
A、峰拖尾
原因 解決方法
1、篩板阻塞 1、a、反沖色譜柱
b、更換進口篩板
c、更換色譜柱
2、色譜柱塌陷 2、填充色譜柱
3、干擾峰 3、a、使用更長的色譜柱
b、改變流動相或更換色譜柱
4、流動相PH選擇錯誤 4、調(diào)整PH值。對于堿性化合物，低PH值更有利于得到對稱峰
5、樣品與填料表面的溶化點發(fā)生反應(yīng)圖 5、a、加入離子對試劑或堿性揮發(fā)性修飾劑
b、更改色譜柱
B、峰前延
原因 解決方法
1、柱溫低 1、升高柱溫
2、樣品溶劑選擇不恰當(dāng) 2、使用流動相作為樣品溶劑
3、樣品過載 3、降低樣品含量
4、色譜柱損壞 4、見A1、A2
C、峰分叉
原因 解決方法
1、保護柱或分析柱污染圖 1、取下保護柱再進行分析。如果必要更換保護柱。如果分析柱阻塞，拆下來清洗。如果問題仍然存在，可能是柱子被強保留物質(zhì)污染，運用適當(dāng)?shù)脑偕胧?。如果問題仍然存在，入口可能被阻塞，更換篩板或更換色譜柱。
2、樣品溶劑不溶于流動相 2、改變樣品溶劑。如果可能采取流動相作為樣品溶劑。
D、峰變形
原因 解決方法
1、樣品過載 1、減少樣品載量
E、早出的峰變形
原因 解決方法
1、樣品溶劑選擇不恰當(dāng) 1、a、減少進樣體積
b、運用低極性樣品溶劑
F、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰
原因 解決方法
1、柱外效應(yīng) 1、a、調(diào)整系統(tǒng)連接（使用更短、內(nèi)徑更小的管路）
b、使用小體積的流通池
G、K’增加時，脫尾更嚴(yán)重
原因 解決方法
1、二級保留效應(yīng)，反相模式 1、a、加入三乙胺（或堿性樣品）
b、加入乙酸（或酸性樣品）
c、加入鹽或緩沖劑（或離子化樣品）
d、更換一支柱子
2、二級保留效應(yīng)，正相模式 2、a、加入三乙胺（或堿性樣品）
b、加入乙酸（或酸性樣品）
c、加入水（或多官能團化合物）
d、試用另一種方法
3、二級保留效應(yīng)，離子對 3、加入三乙胺（或堿性樣品）
H、酸性或堿性化合物的峰拖尾
原因 解決方法
1、緩沖不合適 1、a、使用濃度50-100mM的緩沖液
b、使用Pka等于流動相PH值的緩沖液
I、額外的峰
原因 解決方法
1、樣品中有其他組份 1、正常
2、前一次進樣的洗脫峰 2、a、增加運行時間或梯度斜率
b、提高流速
3、空位或鬼峰 3、a、檢查流動相是否純凈
b、使用流動相作為樣品溶劑
c、減少進樣體積
J、保留時間波動
原因 解決方法
1、溫控不當(dāng) 1、調(diào)好柱溫
2、流動相組分變化 2、防止變化（蒸發(fā)、反應(yīng)等）
3、色譜柱沒有平衡 3、在每一次運行之前給予足夠的時間平衡色譜柱
K、保留時間不斷變化
原因 解決方法
1、流速變化 1、重新設(shè)定流速
2、泵中有氣泡 2、從泵中除去氣泡
3、流動相選擇不恰當(dāng) 3、a、更換合適的流動相
b、選擇合適的混合流動相
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