前面給大家介紹了高大上的Signal-Seeker試劑盒，下面我們來仔細瞧瞧試劑盒中用于蛋白提取和定量的黑科技吧！
通常我們會使用變性裂解緩沖液從各種細胞組分中分離蛋白質(zhì)；然而，變性緩沖液與非變性裂解緩沖液相比有明顯的缺點：如與標準比色蛋白測定不相容、基因組DNA污染導致的粘度過大以及對下游免疫沉淀分析的負面影響。
在這里，我們將介紹Cytoskeleton公司新開發(fā)的BlastR? Rapid Lysate Prep試劑盒，該試劑盒含有一種變性緩沖液—BlastR?裂解緩沖液，可以從所有的細胞組分中分離蛋白質(zhì)，從而得到與其他變性緩沖液(如Laemmli)類似的蛋白質(zhì)圖譜。與常用的變性緩沖液不同，BlastR?緩沖液可與傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)分析方法兼容，便于定量。此外，該試劑盒中包含的BlastR?過濾器能夠比超聲處理或針剪處理更快速、更溫和、更有效地去除基因組DNA污染。該系統(tǒng)與翻譯后修飾（PTM）的免疫沉淀試劑相容。BlastR?快速裂解試劑盒可用于各種細胞或組織，獲得用于Western和免疫沉淀檢測的裂解液。
首先我們通過一個小視頻來了解一下用BlastR? Rapid 試劑盒進行蛋白提取和定量的操作流程吧
上述操作主要分三步走：細胞或者組織裂解、基因組DNA過濾、蛋白定量，下面我們從這三個部分介紹該試劑盒的特點：
用數(shù)據(jù)說話：
一、細胞或者組織裂解
1.BlastR?裂解緩沖液可用于提取各種細胞組分里的蛋白
分別用BlastR、RIPA、mPER、IP Lysis、Denaturing(1% SDS)、Laemmli裂解A431細胞。
同時分別從胞膜、細胞質(zhì)、線粒體和核標記物中分離一些蛋白，我們發(fā)現(xiàn)：
BlastR可以輕松從各個細胞組分中分離蛋白
2.BlastR?裂解緩沖液與傳統(tǒng)蛋白定量（比色法）完美兼容
A：分別用上述6種緩沖液裂解細胞
B：傳統(tǒng)比色法定量，BlastR和RIPA與OD值線性擬合程度非常好
3.BlastR?裂解緩沖液完美兼容免疫沉淀（IP）實驗
大部分變性緩沖液后續(xù)無法進行IP實驗主要是由于緩沖液會破壞磁珠里的抗體或蛋白結(jié)合域，BlastR按說明書建議濃度，不會對磁珠產(chǎn)生干擾。
BlastR?裂解緩沖液提取蛋白進行IP實驗用于研究各種翻譯后修飾（SUMO2/3、乙酰賴氨酸化、泛素化、磷酸化）
4.BlastR?裂解緩沖液可從各種組織中提取蛋白
BlastR可輕松從肝、腦、心臟等各種組織中分離出蛋白
BlastR緩沖液與其他常規(guī)緩沖液優(yōu)勢對比匯總：
| 緩沖液名稱 | 細胞質(zhì) | 細胞核 | 細胞膜 | 線粒體 | 標準蛋白檢測 | IP兼容 |
| BlastR | Yes | +++ | +++ | +++ | Yes | Yes |
| RIPA | Yes | + | ++ | +++ | Yes | Yes |
| Company T | Yes | - | + | + | Yes | Yes |
| Company P | Yes | + | + | +++ | Yes | Yes |
| Denaturing | Yes | +++ | +++ | +++ | No | 有時 |
| 1×Laemmli | Yes | +++ | +++ | +++ | No | No |
注：Company T代表mPER (Thermofisher, MA)
Company P：代表IP Lysis (Pierce, )
二、基因組DNA過濾
 | 過濾裝置及步驟： 1.加入裂解液 2.注射器過濾DNA 3.收集蛋白樣品 |
| BlastR Lysis Filter是高效的基因組DNA過濾裝置 輕松解決基因組DNA污染  | A：分別經(jīng)過BlastR Filter、注射器針頭或超聲處理5、10、20、30秒后的DNA條帶（BlastR Filter處理后無條帶） B：未過濾和用BlastR Filter過濾后經(jīng)SDS-PAGE分離的蛋白條帶 C：B圖的樣品，轉(zhuǎn)至PVDE，用EGFR抗體檢測的EGFR蛋白條帶 不同分子量條帶很清晰，無拖帶現(xiàn)象 |
三、蛋白定量
Cytoskeleton提供了兩種標準的蛋白質(zhì)定量檢測方法：
Advanced Protein Assay?能夠檢測濃度非常低的蛋白（低至1μg/ml）
Precision Red?可用于測定不同緩沖液中的的蛋白質(zhì)。
Precision Red?分別測定Actin、BSA、IgG和Tubulin的標準曲線，線性擬合程度非常好
看到如此優(yōu)秀又方便的蛋白分離與定量工具，你有心動嗎？作為生命科學的專業(yè)解決方案供應商，艾美捷科技為您提供Cytoskeleton公司研發(fā)蛋白分離與定量工具：
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| BlastR Rapid Lysate Prep Kit | 50 purifications | BLR01 |
| BlastR Rapid Filtration Kit | 50 filters | BLR02 |
| Advanced Protein Assay | 1x500 ml/3x500 ml | ADV01-A/ ADV01-B |
| Precision Red Advanced Protein Assay | 1x500 ml/3x500 ml | ADV02-A/ ADV02-B |
Cytoskeleton公司成立于1993年，專注于生物化學和細胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發(fā)與生產(chǎn)。公司提供藥物篩選、信號轉(zhuǎn)導、蛋白質(zhì)翻譯后修飾（PTM）、細胞骨架研究相關(guān)的系列試劑盒和產(chǎn)品，尤其以細胞骨架相關(guān)研究見長，既能滿足于樣品較少的科學研究，也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究。目前主要的產(chǎn)品有340余種，其產(chǎn)品主要覆蓋肌動蛋白，微管蛋白，馬達蛋白，小G蛋白，細胞外基質(zhì)，活細胞成像等相關(guān)領(lǐng)域，提供對應的蛋白質(zhì)，抗體，檢測與分析試劑盒，并且產(chǎn)品線還在不斷的擴大中。此外，公司還提供微管蛋白，肌動蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等現(xiàn)有產(chǎn)品的藥物篩選服務(wù)。
艾美捷科技與國內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應商保持著密切的合作關(guān)系，目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理，主要包括：Abbkine、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Alomone Labs、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、PhytoAB、Norgen Biotek、iRegene、StressMarq、Trevigen、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological等，可以在第一時間為用戶提供最前沿的專業(yè)資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。
作為Cytoskeleton在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的Cytoskeleton產(chǎn)品以及訂制服務(wù)。
