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Nat Microbiol新刊: 定量代謝組學(xué)揭示共生菌影響按蚊營(yíng)養(yǎng)代謝與傳病能力的規(guī)律

來(lái)源:SCIEX 2022-05-07 17:53

按蚊腸道中的共生菌對(duì)其營(yíng)養(yǎng)代謝和傳病能力均至關(guān)重要。

按蚊腸道中的共生菌對(duì)其營(yíng)養(yǎng)代謝和傳病能力均至關(guān)重要。按蚊吸食血液并消化蛋白而獲取色氨酸等必需氨基酸,但共生菌如何參與按蚊的氨基酸代謝并影響其生理過(guò)程尚不清楚。

復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院王敬文教授和唐惠儒教授研究組將上述問(wèn)題相關(guān)的合作研究結(jié)果發(fā)表在Nature Microbiology上(Anopheline mosquitoes are protected against parasite infection by tryptophan catabolism in gut microbiota)。該研究發(fā)現(xiàn)按蚊共生菌可促進(jìn)色氨酸代謝物3-羥基犬尿氨酸(3HK)的累積,進(jìn)而破壞按蚊腸道圍食膜結(jié)構(gòu),促進(jìn)瘧原蟲(chóng)感染。共生菌中的產(chǎn)堿假單胞菌可通過(guò)編碼犬尿氨酸酶,分解3HK而保護(hù)圍食膜,提高按蚊對(duì)瘧原蟲(chóng)的抵抗性。

該研究應(yīng)用SCIEX 四極桿-線性離子阱復(fù)合質(zhì)譜QTRAP?系統(tǒng)定量分析了清除共生菌對(duì)按蚊體內(nèi)色氨酸代謝的影響規(guī)律。研究發(fā)現(xiàn)抗生素清除共生菌導(dǎo)致按蚊體內(nèi)多種色氨酸代謝物的累積,其中3HK的累積會(huì)促進(jìn)瘧原蟲(chóng)感染。進(jìn)一步的機(jī)制研究發(fā)現(xiàn),3HK的累積會(huì)破壞按蚊圍食膜結(jié)構(gòu),促進(jìn)瘧原蟲(chóng)感染。而后,對(duì)按蚊共生菌結(jié)構(gòu)和基因組的分析發(fā)現(xiàn)了可代謝3-羥基犬尿氨酸的產(chǎn)堿假單胞菌。該菌編碼的犬尿氨酸酶可以降解3-羥基犬尿氨酸。突變此基因?qū)е庐a(chǎn)堿假單胞菌喪失對(duì)3-羥基犬尿氨酸的降解作用,從而使按蚊對(duì)瘧原蟲(chóng)易感性增加。總之,按蚊共生菌通過(guò)參與色氨酸代謝而影響瘧原蟲(chóng)感染。

使用SCIEX QTRAP6500+系統(tǒng)(LC-MS/MS),上述研究定量分析了對(duì)照組和抗生素處理組按蚊在血液喂食0h和24h后代謝組差異規(guī)律,特別關(guān)注了13種色氨酸代謝物。進(jìn)一步通過(guò)整合分析代謝組及轉(zhuǎn)錄組等數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)共生菌參與按蚊的色氨酸代謝并調(diào)控宿主對(duì)瘧原蟲(chóng)的耐受性。

文中報(bào)道的13種色氨酸及其代謝物的測(cè)定方法簡(jiǎn)明易行(詳見(jiàn)原文),此做簡(jiǎn)述。將每個(gè)樣本30mg(約15只按蚊)用預(yù)冷的80%甲醇水溶液提取,上清液冷凍干燥。復(fù)溶提取物在MRM模式(詳細(xì)參數(shù)見(jiàn)論文附表6)下進(jìn)行LC-MS/MS定量測(cè)量 (C18色譜柱,10min洗脫時(shí)間)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)從8-10個(gè)生物學(xué)重復(fù)中獲得。


                                                                                           
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